Tiosbio® GelGreen®是独特的油性大分子,不易挥发升华、不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,且在凝胶染色浓度下没有诱变性,具有使用安全、检测灵敏等特点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色。与标准凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置完美兼容,适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。本公司提供的GelGreen®荧光染料为浓缩的10,000×染料。
名称 | GelRed® | GelGreen® | Sybr Green I | EB | Goldview |
灵敏度 | 高 | 高 | 高 | 低 | 低 |
稳定性 | 高 | 高 | 低 | 高 | 高 |
对DNA
迁移影响 |
条带不弯曲 | 条带不弯曲
DNA不迁移 |
染料浓度高时,
条带易发生弯曲迁移 |
条带不弯曲
DNA不迁移 |
条带不弯曲
DNA不迁移 |
安全性 | 安全无毒。独特的油性大分子量;不易挥发;不易吸入;不能穿透细胞膜进入活体细胞,无诱变性,无致癌性 | 安全无毒。独特的油性大分子量;不易挥发;不易吸入;不能穿透细胞膜进入活体细胞,无诱变性,无致癌性 | 花箐染料,能透过细胞膜进入活体细胞内,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。 | 分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。易引起有机体突变,强诱变剂和高致癌物。 | 主要成分为吖啶橙,高毒,致癌,高诱变性。易挥发升华,易吸入人体,能穿透细胞膜进入活体细胞内,不易生物降解,体内长期残留。 |
适用性 | 与EB光谱特性一致,无需改变滤光片及观察装置。普通紫外凝胶透射仪可用,300nm 紫外光附近可得到最佳激发。 | 254nm紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 | >100bp产物电泳染色, 254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 | >100bp产物电泳染色,背景荧光信号高;普通紫外凝胶透射仪观察。 | >100bp产物电泳染色,背景荧光信号高; 254nm 激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。 |
500μL/支。
2~8℃避光保存12月。
Q:哪些仪器可用于GelRed®和GelGreen®的检测?
A:标准(302或312nm)紫外透射成像仪可用于检测GelRed®。254 nm的紫外透射仪、可见光激发的凝胶成像仪(如Dark Reader)或488nm凝胶激光扫描仪均可检测GelGreen®。
Q:GelRed®和GelGreen®适用于什么样的发射滤波片?
A:GelRed®适用于溴化乙锭滤片; GelGreen®适用于SYBR Green或黄色滤片。另外,GelRed®或GelGreen®均适用于长通道黄色滤片。
Q:GelRed®/GelGreen®检测下限多少?
A:GelRed®/GelGreen®是超敏感的染料,可检测含量低至0.1ng的DNA。仪器灵敏度和曝光设置均影响检测极限。
Q:GelRed®/GelGreen®的使用量是多少?
A: 10,000×储备液用于1×甚至0.5×预制凝胶使用量1:10000~1:20000(例如: 5μL用于50~100mL 凝胶),或1:3333 比例用于电泳后染色(15μL用于50 mL溶液)。
Q:GelRed®/ GelGreen®需要在黑暗中使用吗?
A:GelRed®和GelGreen®长期储存需避光,但可在室内光线下使用。
Q:GelRed®/GelGreen®迁移的方向?
A:相对EB,GelRed®和GelGreen®不容易通过凝胶迁移。电泳缓冲液中不需要添加额外的染料,凝胶染色更均匀。
Q: 为何有时会出现污染或微笑的DNA条带或错误的DNA迁移条带?
A: GelRed®和GelGreen®在预制凝胶电泳中会影响DNA 的迁移,尤其国产的某些限制性酶切marker或DNA样本,可能会在GelRed®预制凝胶中发生异常迁移。
Q:后染法需要去除染料的步骤吗?
A: 不需要,但高背景的凝胶可通过适当脱色降低背景。
Q: GelRed®和GelGreen®可用于单链DNA或RNA的染色吗?
A:可以,GelRed®对单链核酸染效果比GelGreen®敏感5倍左右。
Q:GelRed®/ GelGreen®凝胶可以预制、储存吗?
A:完整的GelRed®/GelGreen®预制琼脂糖凝胶可在4℃避光贮存。
Q:GelRed®/GelGreen®的预制胶可以重复使用吗?
A:不可以,连续电泳会降低染色强度。
Q: 预制的GelRed®/GelGreen®凝胶可以重新融化再制备吗?
A: 是的,预制胶溶化后最好再添加一些染料,保证重新制备凝胶的信号强度。
Q:GelRed®/ GelGreen®电泳后染色可重复使用吗?
A:可以。如果敏感度降低,则建议更换新鲜的染料溶液。
Q:GelRed®及GelGreen®与克隆、连接、测序的下游扩增子兼容吗?
A: 兼容。由于GelRed®/GelGreen®与DNA结合比EB更紧密,需要去除样品DNA中的染料,以确保后续操作。
Q:GelRed®/GelGreen®安全性如何?
A:GelRed®/GelGreen®经过埃姆斯AMS及相关测试,已经被证明是可替代EB和SYBR,更安全的染料。但使用这些试剂也要遵循实验室安全条例,以免污染DNA等样品。
Q:GelRed®和GelGreen®用后应该如何处置?
A:GelRed®和GelGreen®通过TUV认证测试,及中国农科院的斑马鱼测试,可以直接倒入下水道。但不同国家和地区的规定可能存在差异,请联系当地的安全监管部门获取相关信息。
Q:GelRed®/GelGreen®染色的胶可用于Southern或Northern杂交吗?对转膜或杂交过程有干扰吗?
A: 建议使用后染法。
Q:GelRed®和GelGreen®在DMSO 和水中两种溶剂中的溶解性及效果是否存在差异?
A: 两种溶剂的效果相似。