Tiosbio® 2× Kappa SYBR Green I qPCR Mix(no ROX)是基于SYBR Green I嵌合荧光法进行Real-Time PCR的2×浓度预混液。该预混液包括热启动DNA聚合酶、反应Buffer、dNTPs、SYBR Green I等试剂,试验时仅需加入引物、模板、水。HotStart Taq DNA Polymerase高温加热前,anti-Taq单克隆抗体与Taq酶结合,抑制Taq酶的聚合酶活性,从而抑制在低温条件下出现的由引物和模板DNA非特异性杂交或引物二聚体引起的非特异性扩增。Anti-Taq单克隆抗体在PCR反应第一循环的变性步骤中已完全失活,不会阻碍之后的Taq Polymerase反应,大大提高了PCR反应的灵敏度及特异性。优化浓度的SYBR Green I 荧光染料,特异性地掺入DNA双链后,荧光信号增强,而不掺入链中SYBR Green I染料分子荧光信号不变,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步,荧光可以在退火或延伸阶段测定。
该产品适用的PCR仪包括:LightCycler (Roche Diagnostics);MiniOpticon、Opticon2、MyiQ 2、CFX96 Real-Time PCR(Bio-Rad & MJ);Line-Gene(Bioer,杭州博日)等。
TR0204-1为1mL,用量为100次(20μL/次);TR0204-5为5mL,用量为500次(20μL/次)。
长期保存,请置于-20˚C,有效期24个月。长期-20℃保存融化后,产品可能会出现沉淀,只需室温融化后混合均匀即可。经常使用,可于4˚C保存六个月。
配制溶液时尽可能减少光下的曝露时间,长时间曝光可导致荧光信号强度丧失
目标片段长度≤300bp时,仅需延伸时间30秒。但某些定量仪器为测定稳定的荧光,延伸时间需要大于30秒。扩增曲线散乱,或者各孔间差异较大时,请设定较长的延伸时间(45~60秒)