Tiosbio® 多功能DNA纯化回收试剂盒采用离心吸附柱纯化核酸,适合从PCR、酶促反应、测序反应的反应液中清洁、回收多至12 μg高纯度DNA(100bp~10kb),回收效率在75%~90%之间,纯化后的DNA不含引物、酶蛋白、单核苷酸、荧光染料或放射性同位素标记的单核苷酸,可用于各种要求的分子生物学实验。
1.离心吸附柱内硅基质膜采用进口特制吸附膜,回收效率稳定、重复性好。
2.溶胶液/结合液 DB具有溶胶液和结合液两种功能,成分不含碘化钠和高氯酸盐,不会抑制下游酶切、连接克隆等反应。
3.溶胶液/结合液 DB加入酚红调制为黄色,可监测 pH 值变化,保证最佳的回收效果。
BT0091S为100次;BT0091L为200次。室温保存,保质期12个月。
BT0091S | BT0091L | |
溶胶液/结合液 DB | 50mL | 100mL |
漂洗液WB | 25mL* | 25mL×2* |
洗脱缓冲液EB | 15mL | 10mL×2 |
吸附柱EC | 100个 | 200个 |
收集管(2mL) | 100个 | 200个 |
*:第一次使用前请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇,加入后请立即钩选标记表示已加入乙醇,以免多次加入!
1.所有的溶液均为澄清状态。环境温度较低时,溶液可能会出现沉淀,需于37℃水浴,待沉淀消失,并将溶液恢复至室温后,方可使用。
2.低温(4℃或者-20℃)储存会导致溶液沉淀,影响使用效果,需于室温(15~25℃)进行运输和储存。
3.长时间暴露于空气中,会导致试剂挥发、氧化、pH 值变化。使用后应及时盖好装有试剂的盖子。
4.溶胶液/结合液DB含有刺激性化合物,操作时要使用乳胶手套,避免溶胶液/结合液DB沾染皮肤、眼睛和衣服。如沾染皮肤、眼睛,应立即用大量清水或者生理盐水冲洗接触部位。
5.可回收纯化100bp~40kb的DNA片段。过长、过短的核酸回收效率都比较低。DNA片段大小、回收DNA的量、回收后的洗脱体积等均会影响回收效率。1~20μg、长度为100bp~5kb 的DNA片段,回收率可达到85%~95%。
6.紫外线会损伤DNA片段。切胶回收时应使用长波紫外线,并且尽可能地缩短紫外灯下的处理时间。
7.pH 值≤7.5 时,吸附膜吸附DNA 的效率最高。如果切下来的凝胶中含有太多电泳缓冲液,会影响溶胶后溶胶液的pH,降低回收率。溶胶后,溶胶液依旧保持黄色,说明pH正常;如溶胶液变为橘红色或者淡紫色,说明pH 偏高,可在胶充分溶解后加5~10μL 3M 醋酸钠(pH=5.2)将pH值调到5~7(黄色)。
8.洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不会影响下游酶切、连接等反应。也可以使用pH 值≥7.5的水洗脱,pH过低会影响洗脱效率。
9.用水洗脱的DNA片段应保存于-20℃。长期保存的DNA片段应使用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),其中的EDTA 可能影响下游的酶切反应,使用时可适当稀释。